• facebook
  • gelinkt
  • youtube
pagina_banner

Cell Direct RT qPCR Kit—SYBR GREEN I Direct Cell Lysis Cell Ready One-step qRT-PCR Kits

Kitbeschrijving:

Cat.nr.DRT-01011/01012

Voor cel directe RT-qPCR met 10-1.000.000 cellen,

en het rechtstreeks uitvoeren van RT-qPCR vanuit cellen zonder voorafgaande RNA-zuivering.

Cellen worden direct gelyseerd om RNA vrij te maken voor RT-qPCR;het systeem met hoge tolerantie maakt het onnodig om RNA te zuiveren en cellysaten direct te gebruiken als RNA-templates voor RT-reacties.Snel en handig;hoge gevoeligheid, sterke specificiteit en goede stabiliteit.

◮Eenvoudig en effectief: met Cell Direct RT-technologie kunnen RNA-monsters in slechts 7 minuten worden verkregen.

De vraag naar monsters is klein, er kunnen slechts 10 cellen worden getest.

◮Hoge doorvoer: het kan snel RNA detecteren in cellen gekweekt in platen met 384, 96, 24, 12, 6 putjes.

DNA Eraser kan vrijgegeven genomen snel verwijderen, waardoor de impact op latere experimentele resultaten aanzienlijk wordt verminderd.

Geoptimaliseerd RT- en qPCR-systeem maakt de tweestaps RT-PCR reverse transcriptie efficiënter en PCR specifieker en beter bestand tegen RT-qPCR-reactieremmers.


Product detail

Productlabels

FAQ

Bronnen downloaden

Beschrijvingen

Deze kit maakt gebruik van een uniek lysisbuffersysteem dat snel RNA uit gekweekte celmonsters kan vrijmaken voor RT-qPCR-reacties, waardoor het tijdrovende en arbeidsintensieve RNA-zuiveringsproces wordt geëlimineerd.De RNA-template kan in slechts 7 minuten worden verkregen.De 5×Directe RT Mix en 2×Directe qPCR Mix-SYBR-reagentia die door de kit worden geleverd, kunnen snel en effectief realtime kwantitatieve PCR-resultaten verkrijgen.

5×Directe RT Mix en 2×Directe qPCR Mix-SYBR heeft een sterke remmertolerantie en het lysaat van de monsters kan direct als sjabloon voor RT-qPCR worden gebruikt.Deze kit bevat de unieke RNA Foregene reverse transcriptase met hoge affiniteit en Hot D-Taq DNA-polymerase, dNTP's, MgCl2, reactiebuffer, PCR-optimizer en stabilisator.

Specificaties

200×20μlRxns, 1000×20μl Rxns

Kit-componenten

Deel I

Buffer CL

Foregene Protease Plus II

Buffer ST

Deel II

DNA-gum

5× Direct RT-mix

2× Directe qPCR Mix-SYBR

50 × ROX-referentiekleurstof

RNase-vrij ddH2O

Instructies

Kenmerken&voordelen

Eenvoudig en effectief: met Cell Direct RT-technologie kunnen RNA-monsters in slechts 7 minuten worden verkregen.

■ De vraag naar monsters is klein, er kunnen slechts 10 cellen worden getest.

■ Hoge verwerkingscapaciteit: het kan snel RNA detecteren in cellen gekweekt in platen met 384, 96, 24, 12, 6 putjes.

■ DNA Eraser kan vrijgegeven genomen snel verwijderen, waardoor de impact op latere experimentele resultaten aanzienlijk wordt verminderd.

■ Geoptimaliseerd RT- en qPCR-systeem maakt de tweestaps RT-PCR reverse transcriptie efficiënter en PCR specifieker en beter bestand tegen RT-qPCR-reactieremmers.

Kit-applicatie

Toepassingsgebied: gekweekte cellen.

- RNA vrijgegeven door monsterlysis: alleen van toepassing op de RT-qPCR-template van deze kit.

- De kit kan voor de volgende doeleinden worden gebruikt: analyse van genexpressie, verificatie van het door siRNA gemedieerde genuitschakelingseffect, screening van geneesmiddelen, enz.

Diagram

Cell Direct RT qPCR-diagram

Opslag en houdbaarheid

Deel I van deze kit moet worden bewaard bij 4 ℃;Deel II zou bij -20℃ moeten worden bewaard.

 Foregene Protease Plus II moet worden bewaard bij 4℃, bevries niet bij -20℃.

 Reagens 2×Directe qPCR Mix-SYBR moet worden bewaard bij -20in het donker;bij veelvuldig gebruik kan hij ook op 4 worden bewaard℃ voor opslag op korte termijn (gebruik binnen 10 dagen).


  • Vorig:
  • Volgende:

  • Ontwerpprincipes voor real-time PCR-primers

    Forward Primer en Reverse Primer

    Voor real-time PCR is het ontwerp van de primer erg belangrijk.Primers zijn gerelateerd aan de specificiteit en efficiëntie van PCR-amplificatie en kunnen worden ontworpen met verwijzing naar de volgende principes:

    Primerlengte: 18-30bp.

    GC-gehalte: 40-60%.

    Tm-waarde: Primer-ontwerpsoftware, zoals Primer 5, kan de Tm-waarde van de primer geven.De Tm-waarden van de stroomopwaartse en stroomafwaartse primers moeten zo dicht mogelijk bij elkaar liggen.De Tm-berekeningsformule kan ook worden gebruikt: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Bij het uitvoeren van PCR wordt over het algemeen een temperatuur onder de Tm-waarde van de primer van 5 °C gekozen als de annealingstemperatuur (de overeenkomstige verhoging van de annealingstemperatuur kan de specificiteit van de PCR-reactie verhogen).

    Primers en PCR-producten:

    De lengte van het PCR-amplificatieproduct van de ontwerpprimer is bij voorkeur 100-150 bp.

    Ontwerpprimers in het secundaire structurele gebied van de sjabloon moeten zoveel mogelijk worden vermeden.

    Vermijd de vorming van 2 of meer complementaire basen tussen de 3'-uiteinden van stroomopwaartse en stroomafwaartse primers.

    Primer 3' eindbasis kan niet aanwezig zijn met 3 extra opeenvolgende G of C.

    De primers zelf kunnen geen complementaire structuren hebben, anders wordt er een haarspeldstructuur gevormd die de PCR-amplificatie beïnvloedt.

    ATCG moet zo gelijkmatig mogelijk in de primersequentie worden verdeeld en de 3'-terminale base moet worden vermeden als T.

    Bijlage 1:Cell Direct RT-qPCR Kit component supplementpakket

    1.Oplossing voor cellyse


    Oplossing voor cellyse

    Kit-componenten

    (24-wells lysissysteem / well)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 T

    500 T

    Een deell

    Buffer CL

    20 ml

    100 ml

    Foregene Protease Plus II

    400 μl

    1 ml × 2

    Buffer ST

    1 ml × 2

    10 ml

    Een deelII

    DNA-gum

    400 μl

    1 ml × 2

    2.RT-mix


    RT-mix

    Kit-componenten

    (20 ul reactiesysteem)

    DRT-01011-B1

    200 T

    5× Direct RT-mix

    800 µl

    RNase-vrij ddH2O

    1,7 ml × 2

     

    3.qPCR-mix


    qPCR-mix

    Kit-componenten

    (20 ul reactiesysteem)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 T

    1000 ton

    2× Directe qPCR Mix-SYBR

    1 ml × 2

    1,7 ml × 6

    50 × ROX-referentiekleurstof

    40 ul

    200 µl

    RNase-vrij ddH2O

    1,7 ml

    10 ml

    Handleidingen:

    QuickEasyTM Cell Direct RT-qPCR Kit-SYBR Groen I

    Schrijf hier uw bericht en stuur het naar ons op