Lnc-RT Heroᵀᴹ I (met gDNase) (Super Premix voor eerste-streng cDNA-synthese van lncRNA)
Specificaties
25×20μlRxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (met gDNase) is een reverse transcriptiesysteem dat speciaal is ontwikkeld voor lncRNA om genomische DNA-verontreiniging snel te verwijderen.5 × gDNase Mix kan snel het resterende genoom in RNA verwijderen bij 42 ° C gedurende 2 minuten, waardoor de interferentie van het genoom op qPCR-resultaten effectief wordt vermeden.
5 × L-RT HeroTM Mix bevat Foregene LncRNA Reverse Transcriptase speciaal ontwikkeld door Foregene, een nieuw type reverse transcriptase specifiek voor lncRNA en andere lange RNA-complexe sjablonen, met sterkere RNA-affiniteit en hogere reversal-opname-efficiëntie.Het geoptimaliseerde systeem maakt de reverse transcriptiesnelheid sneller en kan gemakkelijk RNA-templates transcriberen met een hoog GC-gehalte en een complexe secundaire structuur.De synthese van de eerste cDNA-streng kan bij 42°C in 15 minuten worden voltooid.
Kit-componenten
| 5× gDNase-mix |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| RNase-vrij ddH2O |
| Instructies |
Kenmerken&voordelen
■Efficiënt vermogen om gDNA te verwijderen, dat binnen 2 minuten gDNA in de sjabloon kan verwijderen.
■ Het kan de transcriptie van lncRNA efficiënt omkeren.Wanneer het reverse transcriptieproduct wordt onderworpen aan qPCR, is de Ct-waarde lager dan die van een conventioneel reverse transcriptiesysteem.
■ Efficiënt reverse transcriptiesysteem, het duurt slechts 15 minuten om de synthese van de eerste cDNA-streng te voltooien.
■ Complexe sjablonen: sjablonen met een hoog GC-gehalte en een complexe secundaire structuur kunnen ook zeer efficiënt worden omgedraaid.
■ Zeer gevoelig reverse transcriptiesysteem, sjablonen op pg-niveau kunnen ook cDNA van hoge kwaliteit krijgen.
■ Het reverse transcriptiesysteem heeft een hoge thermische stabiliteit, de optimale reactietemperatuur is 42℃, en het heeft nog steeds goede reverse transcriptieprestaties op 50℃.
Kit-applicatie
lncRNA relatieve kwantitatieve analyse.
lncRNA absolute kwantitatieve analyse.
Het kan spoor-RNA zoals RNA-virus snel en nauwkeurig analyseren.
Omgekeerde transcriptie van RNA-sjablonen met een hoog GC-gehalte of een complexe secundaire structuur.
Werkstroom
Opslag en houdbaarheid
De kit moet worden bewaard bij -20°C. Bewaar het product in een koelkast met constante temperatuur bij -20°C°C direct na ontvangst.Als de opslagomstandigheden geschikt zijn, zal het product gedurende de geldigheidsperiode van 1 jaar geen enkele prestatie verminderen.
Probleemanalyse gids
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-specifieke versterking
1. Onredelijk primerontwerp
Aanbeveling: ontwerp primers volgens de principes van primerontwerp.
2. Genoomresiduen.
Suggestie: Zorg ervoor dat de temperatuur van de eerste stap van de gDNA-verwijderingsreactie 42°C is, en de reactietijd kan ook worden verlengd tot 5 minuten.
Geen versterkingssignaal door RT-qPCR
1. RNA wordt afgebroken.
Aanbeveling: Het materiaal voor RNA-extractie moet zo vers mogelijk zijn en er moet hoogwaardig en zeer zuiver RNA worden gebruikt.
2. RNA bevat remmers.
Aanbeveling: Reverse transcriptieremmers omvatten over het algemeen SDS, guanidinezouten, EDTA, enz. Het wordt aanbevolen om het RNA-precipitaat te wassen met 70% ethanol om de remmers te verwijderen.
3. Problemen met het ontwerp van primers.
Aanbeveling: Herontwerp de primers voor inspectie volgens het primerontwerpprincipe.
De doelband verschijnt in de lege controle
1. Verontreiniging van bedieningsgereedschappen of reagentia.
Aanbeveling: Alle reagentia of apparatuur voor het experiment moeten worden geautoclaveerd.Wees voorzichtig en voorzichtig bij het hanteren om te voorkomen dat DNA-monsters in de pipet worden gezogen of uit de centrifugebuis worden gemorst.
2. Verontreiniging vond plaats tijdens de bereiding van het PCR-reactiesysteem.
Aanbeveling: Neem de nodige voorzorgsmaatregelen bij het hanteren, zoals: het dragen van latexhandschoenen, het gebruik van filtertips.Gebruik Real Time PCR Mix in een contaminatiebestendig systeem.
3. De primers zijn afgebroken.
Suggestie: gebruik SDS-PAGE-elektroforese om te detecteren of de primers zijn afgebroken en vervang deze door nieuwe primers voor fluorescentiedetectie-experimenten.
Handleiding:
