QuickEasyᵀᴹ Realtime PCR Kit-Taqman
Kitbeschrijving:
◮Het unieke PCR-optimalisatiesysteem maakt 2×QuickEasyTMEchte PCR Mix-Taqman meer compatibel.
◮Hot-start Foregene HS Taq Polymerase heeft een hogere amplificatie-efficiëntie, hogere amplificatiegevoeligheid en hogere amplificatiespecificiteit.
◮2× QuickEasyTMReal PCR Mix -Taqman maakt gebruik van een uniek systeem dat door Foregene is geoptimaliseerd om de gevoeligheid en specificiteit van sequentiespecifieke sondedetectie te verbeteren, die kan worden gebruikt voor genotypering en bepaling van de variatie in het aantal kopieën en om nauwkeurige resultaten te verkrijgen.
◮Dit product wordt geleverd met ROX interne referentiekleurstof, die kan worden gebruikt om signaalachtergrond en signaalfout tussen putjes te elimineren, wat handig is voor klanten om te gebruiken in verschillende soorten kwantitatieve PCR-instrumenten.
Beschrijvingen
De 2× QuickEasyTMEchte PCR Mix-Taqman geleverd door QuickEasyTMReal-time PCR-kit-Taqman-kit is een mastermixsysteem van de nieuwe generatie dat is ontworpen voor real-time PCR-amplificatiereacties met behulp van specifieke fluorescerende sondes.De kern van Foregene HS Taq DNA-polymerase is gebaseerd op antilichaammodificatie, gebruikt in combinatie met het verder geoptimaliseerde PCR-systeem van Foregene, heeft een hogere specificiteit en amplificatie-efficiëntie.In vergelijking met een gewone PCR-mix heeft het een sterker versterkingsvermogen en een lager mismatch-percentage.Het kan worden gebruikt in fluorescentie kwantitatieve PCR-reactie om niet-specifieke amplificatie te verminderen en de nauwkeurigheid van PCR te verbeteren.Het kan de productspecificiteit en reactiegevoeligheid aanzienlijk verbeteren.Tegelijkertijd werd ROX geleverd als interne referentiekleurstof.
De QuickEasyTMReal-time PCR-kit-Taqman-kit heeft een breed toepassingsgebied voor de hoeveelheid sjabloon en kan een goede standaardcurve verkrijgen in verschillende kwantitatieve regio's, en kan doelgenen nauwkeurig kwantificeren en detecteren met een goede herhaalbaarheid en hoge betrouwbaarheid.
Specificaties
200 voorbereidingen,500 voorbereidingen,1000 voorbereidingen,2000 voorbereidingen
Kit-componenten
| Snel GemakkelijkTMRealtime PCR-kit-Taqman(20plsysteem) | ||||
| Inhoud pakket | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 voorbereidingen | 500 voorbereidingen | 1000 voorbereidingen | 2000 voorbereidingen | |
| 2×SnelEenvoudigTM Echte PCR Mengen-Taqman | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
| 20×ROX referentiekleurstof | 200μL | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
| DNase-vrij ddH2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
| ALS JE | 1deel | 1deel | 1deel | 1deel |
Kenmerken&voordelen
■ Het unieke PCR-optimalisatiesysteem maakt 2×QuickEasyTMEchte PCR Mix-Taqman meer compatibel.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase heeft een hogere amplificatie-efficiëntie, hogere amplificatiegevoeligheid en hogere amplificatiespecificiteit.
■ 2× Snel GemakkelijkTM Real PCR Mix -Taqman maakt gebruik van een uniek systeem dat door Foregene is geoptimaliseerd om de gevoeligheid en specificiteit van sequentiespecifieke sondedetectie te verbeteren, die kan worden gebruikt voor genotypering en bepaling van de variatie in het aantal kopieën en om nauwkeurige resultaten te verkrijgen.
■ Dit product wordt geleverd met ROX interne referentiekleurstof, die kan worden gebruikt om signaalachtergrond en signaalfout tussen wells te elimineren, wat handig is voor klanten om te gebruiken in verschillende soorten kwantitatieve PCR-instrumenten.
Kit-applicatie
■ Fluorescentie kwantitatieve PCR voor template kwantitatieve analyse;
■Cconventionele PCR-amplificatie;
■ Kan worden gebruikt voor alleldetectie.
Opslag en houdbaarheid
De kit moet in het donker bij -20°C worden bewaard;bij veelvuldig gebruik kan het ook kort bewaard worden bij 4°C (binnen 10 dagen opgebruiken).
Ontwerpprincipes voor real-time PCR-primers
Forward Primer en Reverse Primer
Voor real-time PCR is het ontwerp van de primer erg belangrijk.Primers zijn gerelateerd aan de specificiteit en efficiëntie van PCR-amplificatie en kunnen worden ontworpen met verwijzing naar de volgende principes:
Primerlengte: 18-30bp.
GC-gehalte: 40-60%.
Tm-waarde: Primer-ontwerpsoftware, zoals Primer 5, kan de Tm-waarde van de primer geven.De Tm-waarden van de stroomopwaartse en stroomafwaartse primers moeten zo dicht mogelijk bij elkaar liggen.De Tm-berekeningsformule kan ook worden gebruikt: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Bij het uitvoeren van PCR wordt over het algemeen een temperatuur onder de Tm-waarde van de primer van 5 °C gekozen als de annealingstemperatuur (de overeenkomstige verhoging van de annealingstemperatuur kan de specificiteit van de PCR-reactie verhogen).
Primers en PCR-producten:
De lengte van het PCR-amplificatieproduct van de ontwerpprimer is bij voorkeur 100-150 bp.
Ontwerpprimers in het secundaire structurele gebied van de sjabloon moeten zoveel mogelijk worden vermeden.
Vermijd de vorming van 2 of meer complementaire basen tussen de 3'-uiteinden van stroomopwaartse en stroomafwaartse primers.
Primer 3' eindbasis kan niet aanwezig zijn met 3 extra opeenvolgende G of C.
De primers zelf kunnen geen complementaire structuren hebben, anders wordt er een haarspeldstructuur gevormd die de PCR-amplificatie beïnvloedt.
ATCG moet zo gelijkmatig mogelijk in de primersequentie worden verdeeld en de 3'-terminale base moet worden vermeden als T.
Bijlage 1：Cell Direct RT-qPCR Kit component supplementpakket
1.Oplossing voor cellyse
|
| |||
| Kit-componenten (24-wells lysissysteem / well) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 T | 500 T | ||
| DeelI | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
| Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
| DeelII | DNA-gum | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT-mix
|
| |
| Kit-componenten (20 ul reactiesysteem) | DRT-01011-B1 |
| 200 T | |
| 5× Direct RT-mix | 800 µl |
| RNase-vrij ddH2O | 1,7 ml × 2 |
|
| ||
| Kit-componenten (20 ul reactiesysteem) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 T | 1000 ton | |
| 2× Directe qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
| 50 × ROX-referentiekleurstof | 40 ul | 200 µl |
| RNase-vrij ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
