Directe RT-qPCR-kit
Kitbeschrijving:
◮ Directe RT-qPCR-kit, met behulp van Foreasy Reverse Transcriptase en Foreasy HS Taq DNA-polymerase ontwikkeld door Foregene, met unieke reactiebuffer, maakt deze kit met sterke weerstand en compatibiliteit, en het kan de reactie direct testen met het Foregene Lysis-systeem als sjabloon.Deze kit kan worden gebruikt voor de ontwikkeling van een COVID-19-nucleïnezuurdetectiekit en voor de ontwikkeling van andere pathogene bacteriën voor nucleïnezuurdetectiekits.
Beschrijving
Direct RT-qPCR-kit biedt apart verpakte RT-qPCR-buffer en zeer efficiënt enzymmengsel (Taq、M-MLV、RI), waardoor het handig is voor het maken van back-end kits en systeemaanpassing, binnen eenvoudige verificatie.
Specificaties
500T, 50.000T
Kit-componenten
| Inhoud pakket (20 μL reactiesysteem) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 ton | |
| Direct enzymmengsel | 500 μl×1 | 50 ml×1 |
| 2 × directe RT-qPCR-buffer | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Instructie | 1 | 1 |
Bedieningsstappen
Voordat de reagentia worden bereid, moeten alle reagentia in de kit bij kamertemperatuur worden ontdooid en voorzichtig worden gemengd.
A: Voorbereiden of sjabloon En reagens
1. Bereid het voorbereide RNA-sjabloon voor (het wordt aanbevolen om de Foregene Total RNA Isolation Kit-seriekit te gebruiken om het RNA-sjabloon te extraheren en te zuiveren) of het monster van het kraakproduct (het wordt aanbevolen om het Foregene Lysis-systeem te gebruiken), specifieke primers (10 μM) en andere relevante verbruiksartikelen, instrument.
2. Plaats de 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O en 20× ROX Reference Dye (als'nodig) in de doos met ijs, waardoor deze op natuurlijke wijze smelten, en voorzichtig mengen.
B: Voorbereiden of RT-qPCR systeem
Tafel 1 : Voorbereiden of RT-qPCR ssysteem
| Onderdeel | Volume | Laatste concentratie |
| 2 × directe RT-qPCR-buffer | 10 μL | 1× |
| Direct enzymmengsel | 1μL | |
| Voorwaartse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Omgekeerde primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Sonde (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Sjabloon (RNA of lysaat) | X μL | |
| 20×ROX referentiekleurstof | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Totale volume | 20μL |
C: Set de RT-qPCR reactie programma
Tafel 2 : RT-qPCR reactieon programma instelling (voor voorbeeld: twee-stap methode)
| Stap | Temperatuur | Tijd | cycli | Inhoud | |
| 1 | 50℃ | 15 minuten | 1* | 1 | Omgekeerde transcriptie |
| 2 | 95℃ | 1 minuut | 1 | Pre-denaturatie | |
| 3 | 95℃ | 10 sec | 40-45 | Denaturatie | |
| 60℃ | 30 seconden 2* | Gloeien/Extensie | |||
Opslag en houdbaarheid
-De kit moet worden bewaard bij -20± 5℃.De geldigheidsduur is 12 maanden.
-Vermijd herhaalde cycli van bevriezen en ontdooien (<5 cycli).
