ForeDirect RT-qPCR-kit
Kitbeschrijving:
◮Voor RNA directe real-time amplificatie van uitstrijkjescollecties zonder RNA-zuiveringsprocessen.Deze kit voltooit de qRT-PCR-cycli binnen een uur.De enzymmix is een geoptimaliseerde mix van Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA-polymerase, RNase-remmer.De reactiebuffer bevat alle vereiste componenten, inclusief geoptimaliseerde buffercomponenten, Mg2+, dUTP en dNTP's.
Beschrijving
ForeDirect RT-qPCR Kit is ontworpen voor RNA directe real-time amplificatie van uitstrijkjescollecties zonder RNA-zuiveringsprocessen.Deze kit voltooit de qRT-PCR-cycli binnen een uur.De enzymmix is een geoptimaliseerde mix van Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA-polymerase, RNase-remmer.De reactiebuffer bevat alle vereiste componenten, inclusief geoptimaliseerde buffercomponenten, Mg2+, dUTP en dNTP's.
Specificaties
100T
Kit-componenten
| Afgiftemiddel voor nucleïnezuur |
| RNA-beschermer |
| 2 × RT-qPCR-buffer |
| Enzymmengsel (Taq&M-MLV) |
| Instructies |
PCR-toepassing
1. Nadat de PCR-buisjes kort zijn gecentrifugeerd, plaatst u ze in de monstertank van het amplificatie-instrument.
2. Thermisch protocol
| Stap | Temperatuur | Tijd | cycli | |
| 1 | Omgekeerde transcriptie | 50℃ | 15 minuten | 1 |
| 2 | Pre-denaturatie | 95℃ | 1 minuut | 1 |
| 3 | Denaturatie | 95℃ | 10 seconden | 42 |
| 4 | Gloeien/Extensie | 60℃ | 30 seconden | |
Opmerking:Het fluorescerende signaal werd onmiddellijk na de verlengingsstap van elke cyclus gedetecteerd.
3. Sla na het instellen het bestand op en voer het reactieprogramma uit.
Bedieningsstappen
Voordat de reagentia worden bereid, moeten alle reagentia in de kit bij kamertemperatuur worden ontdooid en voorzichtig worden gemengd.
Bereiding van reagens
1. Bereid de nucleïnezuurafgiftemix voor
| Onderdeel | Volume per monster of controle |
| Afgiftemiddel voor nucleïnezuur | 5μL |
| RNA-beschermer | 0,5 μL |
2. Bereid de reactiemix voor
| Onderdeel | Volume per monster of controle |
| 2 × RT-qPCR-buffer | 15 μL |
| Enzymmengsel (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Primers en sondes | 1μL |
Opslag en houdbaarheid
-De kit moet worden bewaard bij -20± 5℃.De geldigheidsduur is 12 maanden.
-Vermijd herhaalde cycli van bevriezen en ontdooien (<5 cycli).
