China Fabrikant voor 2 × geconcentreerde premix voor ongezuiverd monster Real-time kwantitatieve PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U
De organisatie houdt vast aan het procedureconcept "wetenschappelijk beheer, primaat van hoge kwaliteit en efficiëntie, opperste koper voor de Chinese fabrikant voor 2 × geconcentreerde premix voor ongezuiverd monster Real-time kwantitatieve PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, ons bedrijf is toegewijd om klanten significante en veilige producten van topkwaliteit te bieden tegen een agressieve prijs, waardoor elke klant tevreden is met onze diensten.
De organisatie houdt vast aan het procedureconcept "wetenschappelijk beheer, hoge kwaliteit en efficiëntie primaat, koper opperste voorChina Taq DNA-polymerase en Qpcr, Ons bedrijf heeft een overvloed aan kracht en beschikt over een stabiel en perfect verkoopnetwerksysteem.We zouden willen dat we solide zakelijke relaties konden aangaan met alle klanten uit binnen- en buitenland op basis van wederzijdse voordelen.
Ontwerpprincipes voor real-time PCR-primers
Forward Primer en Reverse Primer
Voor real-time PCR is het ontwerp van de primer erg belangrijk.Primers zijn gerelateerd aan de specificiteit en efficiëntie van PCR-amplificatie en kunnen worden ontworpen met verwijzing naar de volgende principes:
- Primerlengte: 18-30bp.
- GC-gehalte: 40-60%.
- Tm-waarde: Primer-ontwerpsoftware, zoals Primer 5, kan de Tm-waarde van de primer geven.De Tm-waarden van de stroomopwaartse en stroomafwaartse primers moeten zo dicht mogelijk bij elkaar liggen.De Tm-berekeningsformule kan ook worden gebruikt: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Bij het uitvoeren van PCR wordt over het algemeen een temperatuur onder de Tm-waarde van de primer van 5 °C gekozen als de annealingstemperatuur (de overeenkomstige verhoging van de annealingstemperatuur kan de specificiteit van de PCR-reactie verhogen).
- Primers en PCR-producten:
- De lengte van het PCR-amplificatieproduct van de ontwerpprimer is bij voorkeur 100-150 bp.
- Ontwerpprimers in het secundaire structurele gebied van de sjabloon moeten zoveel mogelijk worden vermeden.
- Vermijd de vorming van 2 of meer complementaire basen tussen de 3'-uiteinden van stroomopwaartse en stroomafwaartse primers.
- Primer 3' eindbasis kan niet aanwezig zijn met 3 extra opeenvolgende G of C.
- De primers zelf kunnen geen complementaire structuren hebben, anders wordt er een haarspeldstructuur gevormd die de PCR-amplificatie beïnvloedt.
- ATCG moet zo gelijkmatig mogelijk in de primersequentie worden verdeeld en de 3'-terminale base moet worden vermeden als T.
Bijlage1:Cell DirectRT-qPCR Kit componentent supplementenpakket
1. Cellysisoplossing
Oplossing voor cellyse | |||
Kit-componenten (24-wells lysissysteem / well) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
DeelI | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
DeelII | DNA-gum | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT-mix | |
Kit-componenten (20 ul reactiesysteem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT-mix | 800 µl |
RNase-vrij ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR-mix | ||
Kit-componenten (20 ul reactiesysteem) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 ton | |
2× Directe qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × ROX-referentiekleurstof | 40 ul | 200 µl |
RNase-vrij ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
De organisatie houdt vast aan het procedureconcept "wetenschappelijk beheer, primaat van hoge kwaliteit en efficiëntie, opperste koper voor de Chinese fabrikant voor 2 × geconcentreerde premix voor ongezuiverd monster Real-time kwantitatieve PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, ons bedrijf is toegewijd om klanten significante en veilige producten van topkwaliteit te bieden tegen een agressieve prijs, waardoor elke klant tevreden is met onze diensten.
China Fabrikant voorChina Taq DNA-polymerase en Qpcr, Ons bedrijf heeft een overvloed aan kracht en beschikt over een stabiel en perfect verkoopnetwerksysteem.We zouden willen dat we solide zakelijke relaties konden aangaan met alle klanten uit binnen- en buitenland op basis van wederzijdse voordelen.
Ontwerpprincipes voor real-time PCR-primers
Forward Primer en Reverse Primer
Voor real-time PCR is het ontwerp van de primer erg belangrijk.Primers zijn gerelateerd aan de specificiteit en efficiëntie van PCR-amplificatie en kunnen worden ontworpen met verwijzing naar de volgende principes:
- Primerlengte: 18-30bp.
- GC-gehalte: 40-60%.
- Tm-waarde: Primer-ontwerpsoftware, zoals Primer 5, kan de Tm-waarde van de primer geven.De Tm-waarden van de stroomopwaartse en stroomafwaartse primers moeten zo dicht mogelijk bij elkaar liggen.De Tm-berekeningsformule kan ook worden gebruikt: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Bij het uitvoeren van PCR wordt over het algemeen een temperatuur onder de Tm-waarde van de primer van 5 °C gekozen als de annealingstemperatuur (de overeenkomstige verhoging van de annealingstemperatuur kan de specificiteit van de PCR-reactie verhogen).
- Primers en PCR-producten:
- De lengte van het PCR-amplificatieproduct van de ontwerpprimer is bij voorkeur 100-150 bp.
- Ontwerpprimers in het secundaire structurele gebied van de sjabloon moeten zoveel mogelijk worden vermeden.
- Vermijd de vorming van 2 of meer complementaire basen tussen de 3'-uiteinden van stroomopwaartse en stroomafwaartse primers.
- Primer 3' eindbasis kan niet aanwezig zijn met 3 extra opeenvolgende G of C.
- De primers zelf kunnen geen complementaire structuren hebben, anders wordt er een haarspeldstructuur gevormd die de PCR-amplificatie beïnvloedt.
- ATCG moet zo gelijkmatig mogelijk in de primersequentie worden verdeeld en de 3'-terminale base moet worden vermeden als T.
Bijlage1:Cell DirectRT-qPCR Kit componentent supplementenpakket
1. Cellysisoplossing
Oplossing voor cellyse | |||
Kit-componenten (24-wells lysissysteem / well) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
DeelI | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
DeelII | DNA-gum | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT-mix | |
Kit-componenten (20 ul reactiesysteem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT-mix | 800 µl |
RNase-vrij ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR-mix | ||
Kit-componenten (20 ul reactiesysteem) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 ton | |
2× Directe qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × ROX-referentiekleurstof | 40 ul | 200 µl |
RNase-vrij ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Handleidingen: