Hot-start Taq-enzym wordt veel gebruikt.Vergeleken met gewoon DNA-polymerase, kan hot-start Taq-enzym effectief enige niet-specifieke amplificatie en de vorming van primer-dimeren voorkomen, en kan het slagingspercentage van doelgenamplificatie effectief verbeteren.Vooral op het gebied van genetische tests is hot-start Taq-enzym geïdentificeerd als een verplichte standaard in de industrie en mag gewone DNA-polymerase niet worden gebruikt.Zoals uit het bovenstaande blijkt, worden hot-start Taq-enzymen veel gebruikt.Momenteel zijn er veel merken hot-start Taq-enzymen op de binnenlandse markt, maar er zijn niet veel hot-start Taq-enzymen van hoge kwaliteit.Geconfronteerd met zoveel hot-start Taq-enzymproducten, hoe moeten we kiezen?

1. Selecteer het hot-start Taq-enzym met hoge amplificatie-efficiëntie

PCR-amplificatie-efficiëntie hangt nauw samen met de prestaties van het Taq-enzym.Nadat een goed Taq-enzymreactiesysteem is geoptimaliseerd, is de amplificatie-efficiëntie hoger dan 95% en is het amplificatiebereik van de initiële sjabloonhoeveelheid breed.Bevredigende amplificatie kan worden verkregen wanneer het doelgengehalte laag is, en het is niet gemakkelijk om vergiftigd te worden wanneer de matrijshoeveelheid hoog is en de exponentiële amplificatieperiode lang is.Voor het Taq-enzym met slechte prestaties, zelfs als het reactiesysteem vele malen is geoptimaliseerd, is de amplificatie-efficiëntie nog steeds minder dan 90%, de "S" -vorm van de amplificatiecurve is niet duidelijk, de helling is klein en de curve is vlak.Wanneer de hoeveelheid sjabloon laag is, kan deze niet worden versterkt en wanneer de hoeveelheid sjabloon hoog is, is het versterkingseffect niet ideaal.Daarom is de selectie van DNA-polymerasen met hoge amplificatie-efficiëntie cruciaal voor het succes van PCR en qPCR.

2. Selecteer hot-start Taq-enzym met sterke enzymkracht

De enzymatische kracht van het Taq-enzym is gerelateerd aan de amplificatie-efficiëntie.Over het algemeen geldt: hoe sterker de enzymatische kracht van het hot-start Taq-enzym, hoe langer de exponentiële groeiperiode van PCR-amplificatie, hoe meer typische 'S-vormige' curve, hoe hoger de fluorescentiesignaalwaarde en hoe geschikter voor multiplex PCR-detectie.Merk-DNA-polymerasen met een zwak enzymatisch vermogen kunnen over het algemeen alleen 2-plexreacties ondersteunen.Bij het uitvoeren van 3-plex-reacties is de amplificatiecurve laag, de fluorescentiesignaalwaarde laag en is er geen typische amplificatiecurve, dus de resultaten zijn moeilijk te beoordelen.

3. Selecteer een hot-start Taq-enzym met hoge gevoeligheid

Over het algemeen heeft DNA-polymerase een hoge amplificatie-efficiëntie en een hoge gevoeligheid, maar er zijn ook inconsistenties.Als de overvloed aan doelgenen van het te amplificeren monster laag is, wordt aanbevolen om de amplificatiegevoeligheid van het Taq-enzym te testen.De meest gebruikelijke detectiemethode is het uitvoeren van een 10-voudige of 5-voudige gradiëntverdunning van het doelgen-plasmidefragment, het uitvoeren van PCR-detectie bij de lagere verdunning en het selecteren van het hot-start Taq-enzym met een hogere detectiegevoeligheid.

Uit het bovenstaande blijkt dat onderzoekers moeten kiezen op basis van hun eigen experimentele vereisten en financieringsvoorwaarden.Het is het beste om een ​​amplificatie-experiment met gradiëntverdunning uit te voeren om de amplificatie-efficiëntie en gevoeligheid van het hot-start Taq-enzym te detecteren.

Een voorbeeld van Foregene's Taq DNA-polymerase:

Foreasy HS Taq DNA-polymerase

Beschrijving

Foreasy HS Taq DNA-polymerase is een DNA-polymerase dat tot expressie wordt gebracht in Escherichia coli-engineeringbacteriën door middel van genrecombinatietechnologie.Het enzym wordt gecombineerd met een unieke reactiebuffer, waardoor het product zeer resistent en compatibel is, en kan het monsterlysaat (Foregene Lysis-systeem) direct gebruiken als sjabloon voor detectiereacties.

Sollicitatie

Kwalitatieve PCR en kwantitatieve PCR-detectie van gezuiverde templates en niet-gezuiverde templates.

Kwaliteitscontrole

1. Geen exogene nuclease-activiteit gedetecteerd

2.PCR-methode om achtergebleven genomisch DNA zonder gastheer te detecteren

3. Het kan single-copy genen in het menselijk genoom effectief versterken

4. Bewaren bij kamertemperatuur gedurende een week, geen duidelijke activiteitsveranderingen

Productdetails: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/