Virale DNA- en RNA-isolatiekit Virale DNA- en RNA-extractie Zuiveringsvoorbereidingskits
Specificaties
50 voorbereidingen, 200 voorbereidingen
Viraal RNA Nucleïnezuurzuivering Extractie-isolatiekit maakt gebruik van de spinkolom en formule ontwikkeld door Foregene, die op efficiënte wijze zeer zuiver en hoogwaardig viraal RNA kan extraheren uit monsters zoals plasma, serum, celvrije lichaamsvloeistof en celkweeksupernatant.De kit voegt specifiek lineair acrylamide toe, dat gemakkelijk kleine hoeveelheden RNA uit de monsters kan opvangen.RNA-Only Column kan efficiënt RNA binden.De kit kan een groot aantal monsters tegelijkertijd verwerken.
De hele kit bevat geen RNase, dus het gezuiverde RNA wordt niet afgebroken.Buffer viRW1 en Buffer viRW2 kunnen ervoor zorgen dat het verkregen virale nucleïnezuur vrij is van eiwit, nuclease of andere onzuiverheden, die direct kunnen worden gebruikt voor downstream moleculaire biologische experimenten.
Kit-componenten
| Lineair acrylamide |
| Buffer DRL |
| Buffer RW1, Buffer RW2 |
| RNase-vrij ddH2O |
| DNA/RNA-kolom |
| Instructies |
Kenmerken&voordelen
■ Werking bij kamertemperatuur (15-25℃) gedurende het gehele proces, zonder ijsbad en centrifugeren bij lage temperatuur.
■ Complete kit RNase-vrij, u hoeft zich geen zorgen te maken over RNA-degradatie.
■ Hoge nucleïnezuuropbrengst: alleen DNA/RNA-kolom en unieke formule kunnen DNA en RNA efficiënt zuiveren.
■ Grote monsterverwerkingscapaciteit: tot 200μl monsters kunnen per keer worden verwerkt.
■ Hoge snelheid: eenvoudig te bedienen en kan binnen 20 minuten worden voltooid.
■ Veiligheid: er is geen organisch reagens nodig.
■ Hoge kwaliteit: de gezuiverde RNA-fragmenten zijn van hoge zuiverheid, vrij van eiwitten en andere onzuiverheden, en kunnen voldoen aan verschillende latere experimentele toepassingen.
Kit-applicatie
Het is geschikt voor de extractie en zuivering van viraal nucleïnezuur in monsters zoals plasma, serum, celvrije lichaamsvloeistof en celkweeksupernatant.
Werkstroom
Diagram
Opslag en houdbaarheid
■ Deze kit is 24 maanden houdbaar onder droge omstandigheden bij kamertemperatuur (15-25℃);als het voor een langere tijd moet worden bewaard, kan het worden bewaard bij 2–8 ℃.
■ Lineaire acrylamide-oplossing is 7 dagen houdbaar bij kamertemperatuur;haal de kit er na ontvangst uit en bewaar hem bij -20°C.
■ Nadat lineair acrylamide aan Buffer DRL is toegevoegd, kan het maximaal 48 uur worden bewaard bij 2-8°C.Gebruik de kant-en-klare oplossing.
Probleemanalyse gids
Het volgende is een analyse van de problemen die kunnen optreden bij de extractie van viraal DNA/RNA, in de hoop nuttig te zijn voor uw experimenten.Daarnaast hebben we speciale technische ondersteuning om u te helpen voor andere experimentele of technische problemen dan bedieningsinstructies en probleemanalyse.Als u wensen heeft, neem dan contact met ons op: 028-83360257 of E-mail:
Tech@foregene.com.
Geen nucleïnezuurextractie of lage nucleïnezuuropbrengst
Er zijn meestal veel factoren die de herstelefficiëntie beïnvloeden, zoals: nucleïnezuurgehalte in het monster, werkwijze, elutievolume, enz.
Analyse van veelvoorkomende oorzaken:
1. Tijdens de procedure werd een ijsbad of centrifugatie bij lage temperatuur (4°C) uitgevoerd.
Suggestie: Werk bij kamertemperatuur (15-25°C) gedurende het hele proces, gebruik geen ijsbad en centrifugeer bij lage temperatuur.
2. Het monster is niet goed of te lang bewaard.
Aanbeveling: Bewaar monsters bij -80°C en vermijd herhaaldelijk invriezen en ontdooien;probeer vers verzamelde monsters te gebruiken voor extractie van nucleïnezuur.
3. Onvoldoende monsterlysis.
Aanbeveling: Zorg ervoor dat het monster en de lysis-werkoplossing grondig worden gemengd en gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur (15-25°C) worden geïncubeerd.
4. Onjuiste toevoeging van eluens.
Suggestie: Zorg ervoor dat RNase-Free ddH2O druppelsgewijs wordt toegevoegd aan het midden van het zuiveringskolommembraan en laat het niet op de zuiveringskolomring vallen.
5. Het juiste volume absolute ethanol is niet toegevoegd aan buffer RW2.
Suggestie: Volg de instructies, voeg de juiste hoeveelheid absolute ethanol toe aan Buffer RW2 en meng goed voordat u de kit gebruikt.
6. Onjuist monstervolume.
Suggestie: 200 µl monster wordt verwerkt voor elke 500 µl Buffer DRL.Overmatige monsterverwerking zal resulteren in een lagere opbrengst aan nucleïnezuurextractie.
7. Onjuist elutievolume of onvolledige elutie.
Aanbeveling: het eluensvolume van de zuiveringskolom is 30-50μl;als het elutie-effect niet bevredigend is, wordt aanbevolen om de tijd bij kamertemperatuur te verlengen na toevoeging van voorverwarmde RNase-Free ddH2O, bijvoorbeeld 5-10 min.
8. Ethanol blijft achter op de kolom na wassen met Buffer RW2.
Suggestie: Als er na 2 minuten centrifugeren met Buffer RW2 ethanol achterblijft, kan de kolom na centrifugeren 5 minuten op kamertemperatuur worden geplaatst om resterende ethanol volledig te verwijderen.
Het gezuiverde nucleïnezuur wordt afgebroken
De kwaliteit van het gezuiverde nucleïnezuur is gerelateerd aan de conservering van het monster, RNase-besmetting, werking en andere factoren.Analyse van veelvoorkomende oorzaken:
1. De verzamelde monsters zijn niet tijdig opgeslagen.
Suggestie: Als het monster na verzameling niet op tijd wordt gebruikt, bewaar het dan onmiddellijk bij -80°C bij lage temperatuur.Probeer voor RNA-extractie vers verzamelde monsters te gebruiken.
2. Monsters verzamelen en herhaaldelijk invriezen en ontdooien.
Suggestie: Vermijd bevriezen en ontdooien (niet meer dan één keer) tijdens het verzamelen en bewaren van monsters, anders zal de nucleïnezuuropbrengst afnemen.
3. RNase wordt in de operatiekamer ingebracht of wegwerphandschoenen, maskers etc. worden niet gedragen.
Aanbeveling: RNA-extractie-experimenten kunnen het beste worden uitgevoerd in een aparte RNA-operatiekamer en de laboratoriumtafel moet vóór het experiment worden schoongemaakt.
Draag tijdens het experiment wegwerphandschoenen en -maskers om RNA-afbraak veroorzaakt door de introductie van RNase zoveel mogelijk te voorkomen.
4. Het reagens was tijdens gebruik verontreinigd met RNase.
Aanbeveling: Vervang door een nieuwe Viral DNA/RNA Isolation Kit voor gerelateerde experimenten.
5. De centrifugebuisjes en pipetpunten die worden gebruikt voor RNA-manipulatie zijn verontreinigd met RNase.
Suggestie: Zorg ervoor dat de centrifugebuisjes, pipetpunten, pipetten enz. die worden gebruikt voor RNA-extractie allemaal RNase-vrij zijn.
Gezuiverd nucleïnezuur beïnvloedt stroomafwaartse experimenten
DNA en RNA gezuiverd door de zuiveringskolom, als het zoution- en eiwitgehalte te hoog zijn, zal dit de stroomafwaartse experimenten beïnvloeden, zoals: PCR-amplificatie, reverse transcriptie, enz.
1. Het geëlueerde DNA en RNA hebben achtergebleven zoutionen.
Suggestie: Zorg ervoor dat het juiste volume absolute ethanol wordt toegevoegd aan Buffer RW2 en was de zuiveringskolom tweemaal met de in de gebruiksaanwijzing aangegeven centrifugeersnelheid;Voer centrifugeren uit om besmetting met zoutionen tot een minimum te beperken.
2. Het geëlueerde DNA en RNA bevatten ethanolresten.
Suggestie: Voer na bevestiging van het wassen met Buffer RW2 een lege buiscentrifuge uit met de centrifugatiesnelheid in de gebruiksaanwijzing;als er nog ethanolresten zijn, kunt u de lege buis centrifugeren en vervolgens 5 minuten op kamertemperatuur plaatsen om de ethanolresten zoveel mogelijk te verwijderen.
Handleidingen:
Virale DNA- en RNA-isolatiekit Gebruiksaanwijzing
