• facebook
  • gelinkt
  • youtube

Invoering:

RNA-moleculen kunnen uitgebreid interageren met andere biologische moleculen, zoals eiwit, DNA en RNA, en komen dus voor in cellen en organismen in de vorm van macromoleculaire complexen.Onder hen zijn RNA-eiwitcomplexen het bestaan ​​en de functie van RNA Een van de belangrijke vormen van.RNA pull-down is een klassieke methode voor het screenen en identificeren van RNA-moleculen, met name de op elkaar inwerkende eiwitten van lncRNA-moleculen, en wordt erkend door de meeste onderzoekers en internationale gezaghebbende academische tijdschriften.Vandaag zal FORREGENE het experimentele principe en het technische proces van RNA pull-down met u delen, misschien kunt u het gebruiken

1. Het experimentele principe van RNA pull-down technologie:

In vitro transcriptie en synthese van biotine-gelabelde doel-lncRNA- of lncRNA-fragmenten (inclusief RNA-fragmenten gebruikt als positieve en negatieve controles), en incuberen met celextracten;gebruik avidine-verankerde magnetische korrels om RNA-eiwit- of RNA-RNA-complexen te verzamelen. Na grondig wassen wordt het complex geëlueerd.Als u het doeleiwitmolecuul detecteert dat interageert met lncRNA, voert u eiwitelektroforese uit op het RNA-pull-downproduct, detecteert u het doeleiwit door zilverkleuring en snijdt u de gel voor massaspectrometrie;voer ook direct western blot-verificatie uit op het pull-down-product;indien gedetecteerd Voor RNA-doelmoleculen die interageren met lncRNA, worden RNA-pull-downproducten onderworpen aan RNA-extractie en wordt specifieke qRT-PCR-detectie uitgevoerd.

2. RNA pull-down technologie-experimentproces:

nieuw

3. Technische dienst voor RNA pull-down van FOREGENE:

Cel cultuur

Bereiding van celtotaal/nucleair/plasma-eiwitextract

RNA-pulldown-experiment

SDS-PAGE elektroforese, zilverkleuring

Massaspectrometrie en WB-experimenten

Experimenteel rapport

4. Experimenteel geval

De volgende afbeelding toont de resultaten van FJ Bio-Bio's RNA-pull-down en SDS-PAGE-elektroforesedetectie, waarbij de rode pijl de verschilband markeert:

nieuw2

De onderzoeksgroep van professor Song Xu van de Sichuan University heeft 15 jaar langdurige accumulatie opgebouwd op het gebied van lncRNA-onderzoek.Foregene Bio en de onderzoeksgroep van professor Song Xu werkten samen om de RNA pull-down-technologie van lncRNA te lanceren, wat u een bevredigend resultaat voor uw experiment zal opleveren.


Posttijd: 11 juni 2021