De geboorte van PCR
PCR (polymerasekettingreactie)
Het is meer dan 30 jaar geleden sinds de uitvinding van de polymerasekettingreactie.Al meer dan 30 jaar, nadat talloze wetenschappers over de hele wereld zijn blijven aanvullen en verbeteren, is PCR-technologie de meest gebruikte en belangrijkste basisonderzoeksmethode geworden in het hele Life Sciences-veld.
De TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR, etc. ontwikkeld op basis van de brede toepassing van traditionele PCR-technologie, evenals de nieuw opgekomen Digital PCR (digitale PCR), hebben de onderzoeksmethoden van de meerderheid van de wetenschappelijke onderzoekers enorm verrijkt en het ontwikkelingsproces van moderne biowetenschappen, met name de moleculaire biologie, enorm versneld, heeft grote bijdragen geleverd aan de studie van het leven en de natuur van de mensheid als geheel.
Defecten van traditionele PCR-technologie
Complexe nucleïnezuurscheiding enextractie:
★ Traditionele PCR-technologie: vereist
★ PCR-afgeleide technologie: vereist
★ DNA- en RNA-monsters: grote verschillen, moeilijke operatie-eisen
★ Lichaamsgevaren: toxische reagentia zijn schadelijk voor het lichaam
Traditionele PCR-technologie en afgeleide technologie hebben een vereiste: scheiding en zuivering van nucleïnezuur
Elk biologisch monster moet een reeks gecompliceerde en vervelende monsterverwerking ondergaan om nucleïnezuurmonsters te verkrijgen die voldoen aan de eisen van de PCR-technologie.
Het scheiden en extraheren van DNA en RNA is altijd een basistaak geweest die relevante wetenschappelijke onderzoekers dagelijks moeten herhalen.
Door de enorme verschillen tussen monsters zijn ook de scheidings- en extractieprocessen van DNA en RNA erg verschillend.Dit werk vereist een hoog niveau van technische vaardigheid van operators.Traditionele scheidings- en extractietechnieken vereisen langdurig contact met sommige zeer giftige chemische reagentia.Het veroorzaakt onomkeerbare schade aan het lichaam van de operator en veroorzaakt zelfs directe schade tijdens het experiment.
Tegelijkertijd is de scheiding en extractie van nucleïnezuren voor degenen die een groot aantal monsters moeten bestuderen een arbeidsintensieve taak.
Nucleïnezuurisolatie- en extractiekits op de markt zijn nu volwassen en er zijn veel merken, maar ze zijn ongeveer hetzelfde.Of het nu gaat om een centrifugaalkit voor een silicagelmembraankolom of een kit voor een methode met magnetische korrels, het kost veel tijd en is kostbaar.Naast de kosten van de kit zijn er ook speciale vereisten voor laboratoriumapparatuur.Het geautomatiseerde werkstation dat wordt gebruikt in de methode met magnetische kralen is een zeer typische grootschalige hoogwaardige apparatuur, wat een enorme kostenpost is voor het laboratorium.
samengevat
Voordat PCR-experimenten worden uitgevoerd, is de voorbehandeling van monsters een onvermijdelijke en altijd hoofdpijn voor onderzoekers.Hoe dit probleem op te lossen en of PCR-experimenten kunnen worden uitgevoerd zonder de scheiding en extractie van nucleïnezuren is altijd de gedachte geweest van de meeste wetenschappelijke onderzoekers en klinisch laboratoriumpersoneel.
Foregene's oplossing
Na jaren van nauwgezet onderzoek naar directe PCR-technologie en gerelateerde kits, doorbrak Forgene met succes vele knelpunten en bereikte met succes directe PCR voor veel soorten verschillende monsters met sterke weerstand en aanpassingsvermogen, waardoor onderzoekers zich konden ontdoen van omslachtige en gevaarlijke scheiding en extractie van nucleïnezuren.Dit zal de arbeidsintensiteit van iedereen aanzienlijk verminderen, het experimentproces versnellen en wetenschappelijke onderzoeks- en testkosten besparen.
Forgene's begrip en kennis van DirectPCR
Ten eerste is DirectPCR-technologie een directe PCR-technologie voor verschillende biologische monsterweefsels.Onder deze technische voorwaarde is het niet nodig om nucleïnezuren te scheiden en te extraheren, en wordt het weefselmonster direct als object gebruikt en worden de doelgenprimers toegevoegd voor PCR-reactie.
Ten tweede is DirectPCR-technologie niet alleen een traditionele DNA-template-amplificatietechnologie, maar omvat ook RNA-template reverse transcriptie-PCR.
Ten derde voert DirectPCR-technologie niet alleen rechtstreeks routinematige kwalitatieve PCR-reacties uit op weefselmonsters, maar omvat ook real-time qPCR-reacties, waarvoor het reactiesysteem een sterk vermogen vereist om achtergrondfluorescentie-interferentie te weerstaan en endogene fluorescentie-quenchers tegen te werken.
Ten vierde vereisen de weefselmonsters die het doelwit zijn van de DirectPCR-technologie alleen de vrijgave van nucleïnezuurtemplates en verwijderen ze geen eiwitten, polysacchariden, zoutionen, enz. die de PCR-reactie verstoren.Dit vereist dat de nucleïnezuurpolymerase en PCR-mix in het reactiesysteem uitstekende anti-reversibiliteit en aanpassingsvermogen hebben, en enzymactiviteit en replicatienauwkeurigheid onder complexe omstandigheden kunnen garanderen.
Ten vijfde zijn de weefselmonsters waarop de DirectPCR-technologie gericht is, niet onderworpen aan enige behandeling met nucleïnezuurverrijking en is de matrijshoeveelheid erg klein, wat een extreem hoge gevoeligheid en amplificatie-efficiëntie van het reactiesysteem vereist.
Conclusie
DirectPCR-technologie is een van de belangrijkste technologische ontwikkelingen en innovaties in de afgelopen 30 jaar sinds de geboorte van PCR-technologie.Forgene is en blijft een pionier en innovator van deze technologie.
Het toepassingsperspectief van DirectPCR-technologie is zeer breed.De voortdurende verbetering en promotie van deze technologie zal zeker leiden tot subversieve veranderingen in wetenschappelijk onderzoek en inspectiewerk.Dit is een revolutie in de PCR-technologie.
Posttijd: 21 februari 2017
