Invoering:

RNA, wetenschappelijke naam ribonucleïnezuur, de afkorting komt van RiboNucleic Acid, is een type nucleïnezuur dat wordt gevormd door ten minste tientallen ribonucleotiden te verbinden via fosfodiësterbindingen.

Het uitgangspunt van het onderzoeken van RNA is het extraheren van vervuilingsvrij totaal RNA, en het basisprincipe van RNA-extractie kan grofweg als volgt worden samengevat:

1. Maak eerst de cellen kapot

2. Verwijder vervolgens macromoleculaire onzuiverheden (eiwitten, lipiden, DNA, etc.)

3. Ten slotte wordt het RNA geprecipiteerd terwijl zouten en organische oplosmiddelen worden verwijderd en het RNA verder wordt gezuiverd

Verleden en heden van extractiemethode

De eerste generatie RNA-extractiemethode is de TRIzol-precipitatiemethode (gebruikte reagentia zijn onder meer guanidine-isothiocyanaat, fenol, chloroform, enz.) Uitgevonden door een grootvader genaamd Piotr Chomczynski en oma Nicoletta Sacchi, omdat deze uitvinding RNA-extractie snel en gemakkelijk mogelijk maakt, sindsdien begon de opkomst van RNA-onderzoek.

Later verkocht opa dit patent aan Invitrogen, en Invitrogen promootte deze methode aan de wereld en werd een veelgebruikte methode.

Later werd Invitrogen overgenomen door Thermo!

Representatief product: Invitrogen's TRIzol-reagens

De TRIzol-precipitatiemethode vereist echter meervoudige precipitatie en extractie van RNA, en de gebruikte reagentia zijn giftig en het duurt lang voordat ze werken.

Daarom ontstond de kolom-enzymzuiveringsmethode van de tweede generatie, waarbij silicagelmembraan werd gebruikt als een specifiek nucleïnezuuradsorptiemateriaal om het herstel van RNA in het monster te maximaliseren en tegelijkertijd andere onzuiverheden te verwijderen.

De methode van de tweede generatie vereenvoudigt de operatie op basis van stabiele prestaties, vermindert de risicofactor en verbetert de efficiëntie van RNA-extractie.

Representatieve producten: QIAGEN RNeasy en de meeste huishoudelijke producten

Zowel de methoden van de eerste als de tweede generatie vereisen echter het gebruik van DNase om DNA-verontreiniging te verwijderen, wat enige overlast met zich meebrengt voor latere downstream-experimenten.Residueel DNase zal de efficiëntie van reverse transcriptie verminderen en de synthese van de eerste streng cDNA verminderen, waardoor de nauwkeurigheid van de resultaten wordt beïnvloed.

Daarom is de extractiemethode van de derde generatie geoptimaliseerd op basis van de tweede generatie.Het experiment hoeft geen enzymen toe te voegen en RNA kan eenvoudig worden verkregen met slechts twee kolommen.

Kolom 1: DNA-reinigingskolom om DNA te zuiveren

Kolom 2: Alleen RNA Kolom adsorbeert en herstelt specifiek RNA

Zo'n eenvoudige handeling bespaart niet alleen tijd, maar vergemakkelijkt ook de uitvoering van vervolgexperimenten!

Representatieve producten: QIAGEN RNeasy Plus enForegeneProducten uit de RNA-zuiveringsreeks

（RNeasy Plus）

（van ForegenePlant Total RNA Isolation Kit）

Zeg het rustig!De RNA-kit van Foregene presenteert ook een supergemakkelijk te gebruiken RNase Eraser, die 400 μg RNase op het vaste oppervlak in 1 minuut volledig kan verwijderen, zonder toevoeging van giftige stoffen aan het menselijk lichaam!

foto1: Vergelijkingstabel operationele processen

De producten van Foregene kunnen RNA-extractie in slechts twee nummers voltooien, maak anderen niet jaloers op de voortgang van uw experiment!

foto2:Eexperimentele resultaten vergelijkingstabel

De eerste generatie (1: TRIzol)

De tweede generatie (2: RNeasy van QIAGEN)

De derde generatie (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

foto3: qPCR-grafiek (amplificatiecurvegrafiek)

De eerste generatie (groen betekent TRIzol -, rood betekent TRIzol +)

De tweede generatie (hemelsblauw betekent QIAGEN RNeasy-, rood betekent QIAGEN RNeasy +)

De derde generatie (blauw betekent QIAGEN RNeasy plus, groen betekent Foregene)

(Opmerking: qPCR-grafiek "-" geeft aan dat DNase niet is toegevoegd en DNA-verontreiniging niet is verwijderd. Daarom is de CT hoger en is het resultaat niet nauwkeurig; "+" geeft aan dat DNase is toegevoegd en de DNA-verontreiniging is verwijderd, het resultaat is juist)

Elke technische upgrade betekent dat de werking van het experiment zich in een eenvoudigere en gebruiksvriendelijkere richting ontwikkelt.

Foregene streeft ernaar meer wetenschappelijke onderzoekers te helpen experimentele tijd en kosten te besparen, hoogwaardige experimentele resultaten te verkrijgen en gezamenlijk waardevollere wetenschappelijke onderzoeksresultaten te creëren.